实验室常见生物染色剂的种类和用途

生物染色剂的应用范围涵盖细胞学、组织学、微生物学等领域,以下是几种实验室常用生物染色剂的典型应用:

一、细胞核染色剂

1. 苏木素(Hematoxylin)

用途:核染色(结合伊红用于H&E染色)。

原理:与DNA结合,形成蓝紫色复合物。

应用:组织切片中细胞核显色(需媒染剂如明矾)。

2. 吉姆萨染液(Giemsa Stain)

用途:血涂片、疟原虫、染色体显带。

原理:天青 伊红复合物结合核酸,区分核与胞质。

特点:显示细胞核(紫色)、胞质(蓝色)及病原体。

3. 结晶紫(Crystal Violet)

用途:革兰氏染色(初染)、染色体压片。

原理:穿透细胞壁与核酸结合,革兰阳性菌保留紫色。

二、细胞质染色剂

1. 伊红(Eosin)

用途:胞质及胶原纤维染色(H&E中的“E”)。

原理:酸性染料结合碱性蛋白,呈粉红色。

应用:区分细胞质与核。

2. 亮绿(Light Green)

用途:植物细胞质染色(如与番红联用)。

特点:短暂染色后易褪色,需控制时间。

三、特殊结构染色剂

1. 碘液(Lugol's Iodine)

用途:淀粉检测(蓝黑色)、革兰氏染色媒染剂。

应用:植物细胞淀粉粒显色,细菌革兰染色辅助。

2. 番红O(Safranin O)

用途:革兰氏染色(复染)、植物木质化细胞壁。

特点:革兰阴性菌呈红色,与结晶紫对比鲜明。

3. 苏丹III/IV(Sudan III/IV)

用途:脂类染色(橙红色)。

原理:脂溶性染料溶于脂肪颗粒。

应用:脂肪细胞、细胞膜脂滴观察。

4. 刚果红(Congo Red)

用途:纤维素染色(蓝红色)、淀粉样蛋白检测。

特点:遇酸变蓝,用于植物细胞壁区分。

四、微生物专用染色剂

1. 抗酸染色剂(Ziehl Neelsen Stain)

成分:石碳酸品红(碱性品红+酚)。

用途:结核杆菌、麻风杆菌(抗酸菌呈红色)。

2. 墨汁负染(India Ink)

用途:隐球菌荚膜观察(背景黑色,荚膜透明)。

原理:染料不穿透细胞,凸显透明结构。

3. 乳酸酚棉蓝(Lactophenol Cotton Blue)

用途:真菌菌丝、孢子染色(蓝色)。

特点:兼具固定与染色功能。

五、荧光染色剂

1. DAPI(4',6 Diamidino 2 Phenylindole)

用途:DNA特异性荧光标记(蓝色荧光)。

应用:活细胞或固定细胞核定位。

2. 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)

用途:死细胞核染色(红色荧光)。

原理:不能穿透完整细胞膜,标记坏死细胞。

六、对比表格

染色剂

主要目标

颜色

典型应用场景

苏木素

细胞核

蓝紫色

组织切片H&E染色

伊红

细胞质

粉红色

与苏木素联用(H&E)

吉姆萨

血细胞、病原体

紫/蓝色

疟原虫、染色体分析

结晶紫

革兰阳性菌

紫色

革兰氏染色初染步骤

苏丹III

脂类

橙红色

脂肪细胞染色

DAPI

DNA

蓝色荧光

荧光显微镜核定位

注意事项

1. 毒性:部分染色剂有致癌风险,需戴手套操作。

2. 固定步骤:组织染色前需固定(如甲醛)防止结构破坏。

3. 脱色控制:革兰染色中乙醇脱色时间影响结果准确性。

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