背景描述
蛋白纯化是将目标蛋白从实验样本的总蛋白中分离出来，同时仍保留目的蛋白的生物学活性及化学完整性。在构建载体阶段，除了一些必要的表达元件，还需要考虑密码子优化以及标签的选择。选择合适的标签不但有利于蛋白的纯化，促进蛋白的可溶性，同时也不能影响蛋白的结构功能和下游应用。以下重点介绍GST、MBP标签。
表1 .GST、MBP标签介绍
标签
大小（kD）
功能
是否切除
标签切割酶
GST
26
增强蛋白可溶性，提高蛋白表达量，屏蔽毒性蛋白。仅能纯化可溶性蛋白，如果蛋白不可溶，很难用变性的方法纯化。
标签较大，可能会影响蛋白质的功能和下游实验；需根据下游应用考虑是否切除，如果要去除GST融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。
3C蛋白酶/PSP
MBP
42
增强蛋白可溶性（尤其是真核蛋白）和正确折叠，提高蛋白表达量和蛋白稳定性；屏蔽毒性蛋白
标签较大，对蛋白的结构/功能会有一定影响，需考虑切除，如果要去除MBP融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。
Factor Xa、EK
克隆过程中构建相应的氨基酸识别序列，即可保证后续可通过合适的蛋白酶对GST、MBP融合蛋白标签进行切除。
GST标签蛋白亲和纯化介质
GST标签蛋白亲和层析是利用GST 融合蛋白与固定的谷胱甘肽(GSH)通过硫键共价亲和，通过GSH交换洗脱的原理来进行纯化。该纯化中，凝胶手臂上通过硫键结合一个谷胱甘肽，然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶（即GST-tag）之间酶和底物的特异性作用力，使得带GST标签的融合蛋白能够与凝胶上的手臂谷胱甘肽结合，从而将带标签的蛋白与其他蛋白分离开。谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和还原型 GSH，当我们使用GSH洗脱时，GSH会与凝胶上的谷胱甘肽竞争结合融合蛋白，从而将目标蛋白洗脱。
GSTSep Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以6%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升介质可承载>20 mg GST融合蛋白。本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。
表2.翌圣GST纯化产品选购指南
产品货号
20507ES
20508ES
20509ES/20510ES
20562ES
英文名称
GSTSep Glutathione Agarose Resin
GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF
GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 1 mL / 5 mL
GSTSep Glutathione MagBeads
中文名称
谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于GST标签蛋白纯化)
谷胱甘肽高速纯化树脂（用于GST标签蛋白纯化)
GST标签蛋白纯化预装柱1 mL/5 mL
GST标签蛋白纯化
磁珠
基质
交联的6%
琼脂糖凝胶
高度交联的4%
琼脂糖凝胶
高度交联的4%
琼脂糖凝胶
磁性琼脂糖微球
耐压
0.1 MPa, 1 bar
0.3 MPa, 3 bar
0.3 MPa, 3 bar
N/A
载量
＞20 mg GST 蛋白（40 kDa）/mL基质
＞10 mg GST 蛋白（40 kDa）/mL基质
5-10 mg GST标签融合蛋白/mL磁珠
应用
载量高、基质的耐压一般，适合孵育法、重力柱小量纯化，推荐实验室规模客户使用
载量稍低、基质的耐压性高，搭配蛋白纯化仪可以用于工业大规模蛋白的纯化，更容易放大规模
载量最低，通过磁性分离快速便捷地进行蛋白纯化
附：GSTSep Glutathione MagBeads（Cat#20562ES）产品特点
1、通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白，极大地简化纯化工艺和提高纯化效率，适合科研和工业领域便捷地进行GST融合蛋白的纯化。
2、 使用该磁珠进行GST Pull-down实验，由于磁性分离不需要多次离心和较长的孵育时间，与传统的层析法相比，操作更简单、快速和自动化
附：GST-Tag Protein purification Kit(Agarose Resin)（Cat#20753ES）
GST-Tag Protein purification Kit(Agarose Resin) （GST标签蛋白纯化试剂盒(琼脂糖树脂法)由GSTSep Glutathione Agarose Resin（Cat#20507ES）、优化预制的缓冲液（平衡、洗杂、洗脱缓冲液）、5 mL重力层析空柱（Cat#20522ES）组成，用于高效、快速纯化GST标签蛋白，为GST标签蛋白的纯化带来了极大的便利。
MBP标签蛋白亲和纯化介质
MBPSep Dextrin Agarose Resin是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白（MBP）标签蛋白的亲和层析介质，MBP可促进连接蛋白的正确折叠，增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白，结合的融合蛋白可以用10 mM麦芽糖进行温和洗脱，保护了目的蛋白的活性，MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。
表3.翌圣MBP纯化产品选购指南
产品货号
20515ES
20516ES/20517ES
英文名称
MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF
MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column,
1 mL / 5 mL
中文名称
MBP标签蛋白高度交联纯化树脂
MBP标签蛋白纯化预装柱，1 mL/5 mL
基质
高度交联的6%琼脂糖凝胶
高度交联的6%琼脂糖凝胶
配体
糊精
糊精
耐压
0.3 MPa, 3 bar
0.3 MPa, 3 bar
载量
＞10 mg MBP 蛋白（80 kDa）/mL基质
＞10 mg MBP 蛋白（80 kDa）/mL基质
应用
适合孵育法、重力柱小量纯化，推荐实验室规模客户使用。其耐压骨架，也可搭配蛋白纯化仪用于工业大规模蛋白的纯化，更容易放大规模
预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA等，方便客户操作
测试数据
产品信息
产品定位
产品名称
货号
规格
目录价/元
GST标签蛋白纯化
GSTSep Glutathione Agarose Resin
谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于GST标签蛋白纯化)
20507ES10/50/60/80
10 mL /50 mL/
100 mL/
1000 mL
928/3848/
6898/48686
GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF 谷胱甘肽高速纯化树脂（用于GST标签蛋白纯化)
20508ES10/50/60/80
10 mL /50 mL/
100 mL/
1000 mL
1238/4568/7928/54686
GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 1 mL
GST标签蛋白纯化预装柱, 1 mL
20509ES03/08
1 mL/
5x1 mL
328/1348
GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5 mL
His标签蛋白纯化预装柱, 5 mL
20510ES08/25
5 mL/
5x5 mL
938/3928
GSTSep Glutathione MagBeads
His标签蛋白纯化磁珠
20562ES03/08/25
1 mL /5 mL/
25 mL
285/625/
1565
GST-Tag Protein purification Kit(Agarose Resin) GST标签蛋白纯化试剂盒(琼脂糖树脂法)
20753ES10
10 mL
1315
MBP标签蛋白纯化
MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF
MBP标签蛋白高度交联纯化树脂
20515ES08/25
5 mL /25 mL
858/2958
MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 1 mL
MBP标签蛋白纯化预装柱1 mL
20516ES03/08
1 mL/
5x1 mL
358/1258
MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 5 mL
MBP标签蛋白纯化预装柱5 mL
20517ES03/25
5 mL/
5x5 mL
1238/3958
相关产品订购
产品名称
货号
规格
目录价/元
Glutathione,Reduced(GSH)
还原型谷胱甘肽(GSH)
60342ES10/
60/80
10 g /100 g/
1 kg
209/1156/
4596
3C Protease
20409ES60/76/80
100 U/500 U/
500 U×2
372/923/1473
Bovine Thrombin,High Specific Activity,>2000 IU/mg 牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)
20402ES03/05
1 KU/2 KU
536/956
Recombinant Bovine Enterokinase, His, Expressed in Yeast 酵母表达重组牛肠激酶(His标签)
20395ES60/76/90
100 U/500 U/
5000 U
425/1245/
6745